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【答疑解惑】微生物培養基使用中常出現的問題分析解答

放大字體  縮小字體 發布日期:2022-10-20  瀏覽次數:114
核心提示: 工作中發現,有部分檢驗員對培養基的使用存在一些障礙,借此機會和大家分享討論一下大家常見的對培養基存在的一些疑問。&#
 工作中發現,有部分檢驗員對培養基的使用存在一些障礙,借此機會和大家分享討論一下大家常見的對培養基存在的一些疑問。

 

1、培養基煮沸溶解后再高壓滅菌,還是直接高壓滅菌存在疑惑。

拿麥康凱瓊脂舉個例子,溶解后滅菌,平板上沒有不溶的結晶紫,沒有紫色的斑點;相對比未溶解滅菌的,平板上有結晶紫和紫色的斑點。所以正確的做法是先煮沸溶解后再高壓滅菌。

 

2、培養基PH值為什么不在標準范圍內?

其實出現這個情況的問題有很多種,大致課分為這么6大點:

①質量不好(生產廠家出廠時pH就不正確);

②滅菌問題(高壓滅菌溫度過高或滅菌時間過長,導致葡萄糖類焦化從而pH降低);

③保存時間(超過保質期或結塊);

④水質出現問題(可以用去離子水、純化水、蒸餾水不能用礦泉水、自來水);

⑤保存溫度(保存溫度過高);

⑥光線直射總結本人認為以上6點都可能導致培養基pH出現偏差,如果出現此類問題,建議逐一排查,直到問題解決圖片

 

3、培養基高壓滅菌時為什么會焦化?

不少檢驗人員在實驗時,發現經過滅菌的培養基有焦化現象,個人認為引起此現象的主要原因有以下4點:

①可能你滅菌的時候溫度超過了121℃(正常115-116℃20min即可);

②滅菌時間過長;

③培養基在容器中裝的太多(不要超過容器容量的80%);

④滅完菌的培養基在高溫環境中保存的時間過長,這些都會導致培養基發生焦化現象。

 

4、培養基PH怎么測定?

通常分兩種情況:

①對于無需高壓滅菌的培養基,先煮沸溶解后再冷卻至25℃時,測定其pH值(固體培養基至少測2個點,取其平均值);

②對于需要高壓滅菌的培養基,高壓滅菌后,冷卻至25℃測其pH(固體培養基至少測2個點,取其平均值)。

 

5、含瓊脂培養基在倒平板為什么有時候不凝固或凝固不好?

針對以上情況,我做了分析:

①針對需要高壓滅菌的培養基,倒平板時候要先搖勻(因為瓊脂分子量比較大,在冷卻過程中容易沉淀到底部,導致瓊脂分散不均勻);

②針對無需高壓滅菌的培養基,一次煮沸溶解后不能直接倒平板,應重復煮沸溶解3-5次(因為一次不能確保瓊脂完全溶解)。

 

6、為什么同一品牌的不同批號,粉末顏色有差別?

分析可能有3個原因:

①此培養基成分含有染料或指示劑;

②不同批次粉末培養基含水量不同,一般要求≤6%,含水量越高,顏色越深;

③加工時球磨時間越長顏色越深。

 

此次分享,主要是對微生物培養基使用這塊會遇到的常見問題進行簡單分析,希望通過短短幾行字,能夠幫助廣大在實驗中出現過此類問題的同仁,文章觀點參考,若有不對的地方忘諸位指正,謝謝圖片圖片圖片

編輯:songjiajie2010

 
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