食品伙伴網服務號

維生素C的測定

放大字體  縮小字體 發布日期:2010-09-01  瀏覽次數:16179
核心提示:維生素C是一種已糖醛基酸,有抗壞血病的作用,所以被人們稱做抗壞血酸,主要為還原型及脫氫型兩種,廣泛存在于植物組織中,新鮮

維生素C是一種已糖醛基酸,有抗壞血病的作用,所以被人們稱做抗壞血酸,主要為還原型及脫氫型兩種,廣泛存在于植物組織中,新鮮的水果、蔬菜,特別是棗、辣椒、苦瓜、柿子葉、獼猴桃、柑橘等食品中含量較多。它是氧化還原酶之一,本身易被氧化,但在有些條件下又是一種抗氧化劑。

維生素C(還原型)純品為白色無臭結晶,熔點190192℃,溶于水或乙醇中,不溶于油劑。在水溶液中易被氧化,在堿性條件下易分解,在弱酸條件中較穩定,維生素C開始氧化為脫氫型抗壞血酸(有生理作用)。如果進一步水解則生成23-二酮古樂糖酸,失去生理作用。

根據它具有的還原性質可以測定維生素C的含量。常用的測定方法有

126-二氯靛酚法  (還原型VC

224-二硝基苯肼法  (總VC

3)碘酸法

4)碘量法

5)熒光分光光度法

一、26-二氯靛酚滴定法

1、原理:

還原型抗壞血酸還原染料26-二氯靛酚,該染料在酸性中呈紅色,被還原后紅色消失。還原型

抗壞血酸還原26-二氯靛酚后,本身被氧化成脫氫抗壞血酸。在沒有雜質干擾時,一定量的樣

品提取液還原標準26-二氯靛酚的量與樣品中所含維生素C的量成正比。

2、試劑

1%草酸溶液:稱取10g草酸,加水至1000ml

2%草酸溶液:稱20g草酸,加水至1000ml

維生素C標準液:準確稱20mgVC溶于1%草酸中,并稀釋至100ml,吸5ml50ml容量瓶中,加入1%草酸至刻度,此溶液每毫升含有0.02mgVC

0.02%26-二氯靛酚溶液:稱取26-二氯靛酚50mg,溶于200ml含有52mg碳酸氫鈉的熱水中,冷卻后,稀釋至250ml,過濾于棕色瓶中,貯存于冰箱內,應用過程中每星期標定一次。

標定一:吸標液(VC5ml于三角瓶→加6%KI溶液0.5ml→加1%淀粉3滴→用0.001N KIO3標液滴定到淡蘭色。

計算:

抗壞血酸濃度(mg/ml= V1 × 0.088/ V2

V1 - 滴定時消耗0.001N KIO3標液的體積(ml

V2 -維生素C重量(g

0.088 -1ml0.001N KIO3標液≈維生素C的量(mg/ml

標定二:吸5ml已知濃度V C標液 5ml1%草酸 用染料26-二氯靛酚滴定至溶液呈粉紅色,在15秒不褪色為終點

計算:每毫升26-二氯靛酚相當于維生素C的毫克數等于滴定度(T

T= C × V1/  V2

C - 維生素C的濃度(mg/ml

V1 -維生素C的體積(ml

V2 -消耗26-二氯靛酚的體積(ml

0.001N KIO3標液:吸0.1N KIO3溶液5ml→于500ml容量瓶內→加水至刻度,每毫升相當于VC0.008mg

0.5%淀粉溶液;

6%KI溶液;

3、操作方法

提取:稱樣50g→加2%草酸100ml→到入搗碎機中→處理→過濾→顏色若深可加白陶土

滴定:吸5ml樣液→于三角瓶→用染料滴定至粉紅色→15秒內不褪色

計算:

VCmg/100g=V × T/ W   × 100

V -消耗染料體積(ml

T -1ml染料所能氧化維生素C的毫克數

W- 滴定時所有濾液中含有樣品的克數

4、注意事項

⑴ 所有試劑的配制最好都用重蒸餾水;

⑵ 滴定時,可同時吸二個樣品。一個滴定,另一個作為觀察顏色變化的參考;

⑶ 樣品進入實驗室后,應浸泡在已知量的2%草酸液中,以防氧化,損失維生素C

⑷ 貯存過久的罐頭食品,可能含有大量的低鐵離子(Fe2+),要用8%的醋酸代替2%草酸。這時如用草酸,低鐵離子可以還原26-二氯靛酚,使測定數字增高,使用醋酸可以避免這種情況的發生;

⑸ 整個操作過程中要迅速,避免還原型抗壞血酸被氧化;

⑹ 在處理各種樣品時,如遇有泡沫產生,可加入數滴辛醇消除;

⑺ 測定樣液時,需做空白對照,樣液滴定體積扣除空白體積。

二、24-二硝基苯肼法

可測總抗壞血酸,總抗壞血酸包括還原型、脫氫型和二酮古樂糖酸型。此法是將樣品的還原型抗壞血酸氧化為脫氫型抗壞血酸,然后與24-二硝基苯肼作用,生成紅色的脎。脎的量與總抗壞血酸含量成正比,將紅色脎溶于硫酸后進行比色,由標準曲線計算樣品中總VC

1、原理:

用酸處理過的活性碳把還原型的抗壞血酸氧化為脫氫型抗壞血酸,在繼續氧化為二酮古樂糖酸。

二酮古樂糖酸與24-二硝基苯肼偶聯生成紅色的脎,其成色的強度與二酮古樂糖酸濃度呈正

比,可以比色定量。

2、步驟

樣品處理與分析

稱一定樣 加等量2%草酸 于高速搗碎機搗碎 取勻漿20g 1%草酸定容100ml 過濾 取濾液10ml 1%草酸10ml 加少量活性炭 1分鐘 靜置過濾 各取濾液2ml于樣品管和樣品空白管 各管加入1滴硫脲溶液 于樣品管中加入24-二硝基苯肼0.5ml 分別于兩個管加蓋 37℃保溫箱3小時 取出后樣品管放入冰水中 樣品空白管取出后冷至室溫 在樣品空白管加入24-二硝基苯肼 0.5ml 樣品管和空白管都于冰浴中 滴加85%H2SO42ml于各管中 邊滴邊搖 防止溫度升高炭化后呈黑色 冰浴中30分鐘后取出 室溫下放置30分鐘后,在540nm測消光值,從標準曲線上查出相應的含量

標準曲線的繪制

550ml容量瓶編號  1     2     3     4     5

VC標液0.2mg/ml     10    20    30    40    50ml

5個比色管取相應     2     2     2     2     2

加硫脲溶液(滴)       1     1     1     1     1

24-二硝基苯肼(ml0.5   0.5    0.5   0.5    0.5     

37℃保溫箱34小時,取出于冰浴中,然后滴加85%硫酸2.5ml→取出放30分鐘→在540nm下測各消光值繪標準曲線,同時做空白。

計算:每百克食品中抗壞血酸的毫克數=C/W *100

編輯:foodyy

 
分享:
[ 網刊訂閱 ]  [ 檢驗技術搜索 ]  [ ]  [ 告訴好友 ]  [ 打印本文 ]  [ 關閉窗口 ] [ 返回頂部 ]
 

 
 
推薦圖文
推薦檢驗技術
點擊排行
檢驗技術
 
 
Processed in 0.020 second(s), 14 queries, Memory 1.01 M
a片免费观看网址,a夜夜爽8888免费视频,A片在线播放网址,a级毛片免费高清视频